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细胞骨架染料与标记鬼笔环肽常见问答 - 尊龙凯时助您解答

发布时间:2025-03-18   信息来源:成雯珍

尊龙凯时推出的冻干粉产品可能让您感到困惑,尤其是为何收到的是空管。请注意,该产品以冻干粉的形式存在,微量不易观察。在使用之前,务必进行瞬时离心,并在适量溶剂中溶解后再进行实验。

细胞骨架染料与标记鬼笔环肽常见问答 - 尊龙凯时助您解答

鬼笔环肽与细胞固定

在进行鬼笔环肽染色细胞骨架的过程中,常常会有一个问题:能否使用甲醇固定细胞?答案是不能,因为甲醇会破坏Actin蛋白,因此需要使用不含甲醇的固定液,例如甲醛。

信号检测问题

当使用鬼笔环肽结合F-actin标记石蜡切片时,如果没有检测到信号,可能是因为细胞和组织经过二甲苯或丙酮等溶剂处理,这会干扰F-actin的结合。建议使用冷冻切片而非石蜡切片,或者采用抗肌动蛋白抗体来增强信号的检测。

探针浓度及染色效果

关于探针浓度,建议您按照尊龙凯时说明书中的稀释比例进行使用,具体浓度信息未提供。如果在染色F-actin的过程中出现部分染上、部分没有染上,且染色信号较弱的情况,您可以尝试以下建议:

  • 增加染料浓度或延长孵育时间。
  • 确认您的过滤器设置,以确保在正确的波长下进行分析。

透化步骤的必要性

没有进行透化步骤的直接染色是否可行?鬼笔环肽只能在固定透化后的细胞或组织切片中有效,因此直接染色固定后的细胞是不推荐的。

无荧光信号怎么办

如果染色后没有荧光信号,请考虑以下因素:

  • 检查储液和工作液的配制是否正确。
  • 固定和透化步骤至关重要,建议使用新鲜配置的4%多聚甲醛进行固定,并使用新鲜配置的0.5% Triton X-100进行透化。
  • 优化固定及透化时间,确保最佳效果。
  • 调整染色工作液浓度及染色时间。

流式细胞和荧光显微镜的使用

该产品主要用于微丝的染色,通常建议使用荧光显微镜进行观察,而不推荐流式细胞检测。普通荧光显微镜可以使用,但激光共聚焦显微镜的效果会更加优越。

染料的重复使用

关于鬼笔环肽染料的重复使用,正常情况下,一次性使用后可能会影响染色效果,因此不建议重复使用。按照尊龙凯时说明书添加的浓度通常较低,这也是染料无法重复利用的一个原因。