尊龙凯时提供的人套细胞淋巴瘤细胞REC1培养说明书详细介绍了细胞的培养条件、处理步骤以及售后条款，确保您高效、安全地操作细胞培养实验。

一、细胞培养条件

细胞名称：人套细胞淋巴瘤细胞REC1

生长特性：悬浮生长

冻存条件：无血清冻存液

培养体系：1640培养基 + 10% FBS + 1% P/S

传代方法：首次建议1:2进行传代

备注：用无菌离心管收集培养基以便于进行对比实验，如效果不佳，建议直接购买尊龙凯时的完整培养基。

二、细胞处理规范

收到细胞后，待其维持在良好状态时，使用完整的培养液灌满细胞瓶并封好瓶口。运输细胞时，首先用75%酒精消毒整个细胞瓶，之后放入超净工作台进行无菌操作。将细胞瓶放置在37℃、5% CO2的培养箱中静置3-4小时，以稳定细胞状态，随后进行处理。用显微镜观察细胞生长情况，并拍照（建议40x、100x和200x各一张），前三天的照片是售后依据，若未提供则认定状态良好。

三、细胞培养步骤

a. 细胞传代

若未超过80%汇合度，收集瓶中的培养液至离心管中，提供5ml完全培养基于37℃、5% CO2孵箱中培养。若细胞密度超过80%，可进行以下传代步骤：

1. 弃去培养上清，使用无钙、无镁的PBS对细胞进行1-2次润洗。
2. 添加0.25%的胰蛋白酶消化液约1-2ml至培养瓶中，在37℃培养箱中消化1-2分钟，显微镜下观察细胞状态，若大多数细胞开始变圆并脱落，迅速结束消化。
3. 轻轻吹打细胞使其完全脱落，吸出悬液并转移至15ml离心管中，1000RPM离心5分钟，弃去上清液并添加1-2ml完全培养基重悬。
4. 按1:2的比例进行分瓶传代（两个T25瓶），并补充新的培养基，最后放入37℃、5% CO2培养箱中。

b. 细胞冻存

1. 当细胞覆盖培养瓶的80%时，弃去培养液，使用PBS清洗细胞一次。
2. 添加约1ml的胰蛋白酶消化液，待细胞回缩后加入5ml完全培养液以终止消化，轻轻吹打后转移至15ml离心管，并在1000RPM下离心5分钟。
3. 弃去上清，加入1ml尊龙凯时无血清冻存液，混匀后装入冻存管中。
4. 将冻存细胞置于-80℃冰箱中，需在24小时以上后再转入液氮罐。

c. 细胞复苏

1. 从液氮中取出冻存管，快速放入37℃水浴解冻，确保未结晶后用75%酒精擦拭外壁。
2. 将细胞转移至含5ml完全培养基的离心管中，1000RPM离心5分钟。
3. 弃去上清，用5ml完全培养基重悬，接种至T25培养瓶中，在37℃、5% CO2培养箱中培养。
4. 次日更换新的完全培养基继续培养。

四、注意事项

在运输过程中，有些细胞可能会松脱，这是正常现象。如细胞脱落较多，可将细胞培养液收集至离心管，1000RPM离心5分钟，收集上清液进行过渡培养，并进行后续处理。

五、售后条款

1）可重发的情况及判定标准：

1. 运输过程中的问题，如细胞丢失、破损等，均可重发。
2. 污染问题需在48小时内提供实验结果，核实后可重发。
3. 在常温或干冰运输后，细胞未存活且有照片证据可重发。
4. 活性问题，需在7天内提供台盼蓝染色法结果以核实。

2）不予重发的情况：

1. 因客户原因导致的细胞污染。
2. 不当操作造成的细胞状态不佳。
3. 非尊龙凯时推荐的培养体系引起的问题。
4. 未提供细胞前三天的培养照片。

如需更多信息或购买产品，请访问尊龙凯时官方网站，并确保您的细胞实验顺利进行。