在生物医学领域,Matrigel基质的特性十分重要。Matrigel的颜色会发生变化(从淡黄色到深红色),这种色差是由于酚红和碳酸氢盐与CO2的反应所致,但在与5% CO2平衡后,这种色差会显著减小。在经历冻融操作后,轻轻摇晃试剂瓶有助于均匀分散Matrigel。同时,所有操作都必须在无菌环境中进行,确保使用的试剂瓶瓶盖经过70%乙醇的擦拭并自然干燥。为保证Matrigel呈均匀的液态,建议使用预冷的移液器。
细胞可以在0.5mm厚度的Matrigel基质层表面生长,也可以在1mm厚度的三维Matrigel基质中增殖。需注意,过度稀释的Matrigel会在基质中形成非胶质的蛋白层,此类层面适用于细胞贴壁,但不适合细胞分化研究。此外,冻融后的Matrigel可分装入多个小管中,每个小管使用预冷的冻存管,迅速冷冻以避免多次冻融造成的影响。
Matrigel在22-35°C的温度下会快速成胶,因此在解冻时应在4°C冰上过夜,以防止其在解冻过程中部分成胶。所有操作药具需提前置于冰浴中,务必使用预冷的移液管、吸头及小管进行Matrigel的操作。处理后的Matrigel在424-48小时内可以再次变为液态。为了保证Matrigel基质膜的成胶性能与稳定性,稀释浓度不应低于1:3,可以使用无血清培养基进行稀释,并在Matrigel成胶后立即使用。
尊龙凯时推荐以下两种Matrigel成胶方法:薄胶成胶和厚胶成胶。对于薄胶成胶,首先冻融后,用预冷的移液枪头将Matrigel充分混匀。接着,将所需培养板置于冰上,加入浓度为50μL/cm²的Matrigel基质,并在37°C下放置30分钟即可使用。厚胶成胶方法则需要在冻融后,同样用预冷的移液枪头混匀Matrigel。在冰浴中,将细胞与Matrigel基质混合,使细胞悬浮于基质中,加入浓度为150-200μL/cm²的Matrigel基质后,在37°C下放置30分钟可完成成胶过程。
最后,对于薄层包被方法,冻融后的Matrigel需要用预冷的移液枪头混匀。根据需要,可以将Matrigel稀释于无血清培养基中,以便确定最佳的包被浓度。将稀释后的Matrigel基质包被在所需的培养器皿中,包被量应覆盖整个器皿生长表面,并在室温下孵育1小时。采用尊龙凯时的Matrigel产品,可以确保实验的可靠性和高效性,同时满足各种细胞培养实验的需求。